鄰苯二甲醛法測定尿素的體會
發布時間：
2022-10-18
尿素是最早被測定的體液中的物質之一t其測定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶聯速率法等t這些方法或是存在煮沸，或是試劑價格較昂貴 目前，市場上
供應了鄰苯二甲醛顯色法(OPA)測定尿素試劑盒，該 法不需煮沸，簡便、快速、準確、穩定易得。我們根據反應 原理，在 ISP-M 半自動生化分析儀上進行尿素測定， 效果滿意。特做報道
1 原理
在酸性環境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下與 鄰苯二甲醛作用生成黃色物質，該物質在偏釩酸根的作 用下變為藍色物質。該物質藩液顏色的深淺在一定范圍
內與血清尿素濃度成正比，與同樣處理的標準物一起比 色測定，即可得到血清標本中尿素的濃度。
2 材料與方法
2．I 試劑 OPA法測定尿索試劑盒}其中包括A液 B 液，尿素標準液，僳定長城臨床試劑公司t批號 951102。 酶偶聯速率法測定尿素試劑盒：上海長征醫學科學有限
公司，批號 950828
2．2 儀器
IsP—M 半自動生化分析僅，型號V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在臨用前 10：1混臺．25ul樣 本中加入1．1ml混臺液，37"(315分鐘．在IsP—M半自 動 生化分析儀上 測定 終點法，比空白調霉，波長 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同時以咎氨酰脫氫 醇偶聯反應法，也在半自動生化分析僅上進行動力學分 析。
3 結果與討論
作者單位，五河縣壓院檢驗科(233309) 試劑。但進口試劑價格較貴，使用國產試劑或自配試劑 必須達到與進口試劑相同的檢驗效果，井用標本質控液 進行標定，方可使用 叢玉隆在血液分析儀應用中的幾個問題Ⅲ一文中 指出：細胞直方圖既給臨床提供診斷參考數據，也為操 作人員提供對儀器工作狀態和實驗結果是否可信的監 控，一般必須在仔細分析直方圖后，確定是否需要顯微 鏡檢查再發報告。我們應該不斷的總結經驗 ，發現問題， 不斷提高專業人員的技術水平，使其更好的為臨床醫療 工作服務
3．1 線性范圍 在 0～71．4mraol／I范圍內配制 Lo種 不同濃度的尿素溶液 ，每種濃度溶液重復測定 3捷 該 法在尿素維度o～28mraol／I之閫線性良好。
3．2 精密度實驗 選用高、中、低值尿素(濃度為 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，測定 2O次，其批內CV分別為 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分別為 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事實驗
在尿素濃度為 7．87和 21．50mmol／ l的血清標本中，加入尿素濃度為 6．Ommol／1．，然后進行 測定，其回收率分別為 90 和 98
3．4 干擾實驗 配制 513mmol／1膽紅索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血紅蛋白做干擾實 驗．發現無明顯干擾 (P>005)t維生索 C濃度低于
75mg／1時無干擾(P>0．05)實驗室使用的重氨試劑對 苯磺酸可干擾反應．測定時應防止此類物質在實驗室中 污染 。
3．5 準確性實驗 用 OPA顯色法和各氧酰脫氫酶偶聯速率法同時測定血清標本 50倒(本院門診健康體檢 者)，分別得 土S為 5．18士1．70、5．28±1．73。統計學
處理，兩法無顯著性差異(P>0．05)，相關系數 r為 o． 9804．回歸方程 Y一1．0ix+0．0456。
總之，鄰苯二甲醛法測定尿索既有酶法的方便．可 自動化分析，又價廉，試劑穩定可室溫保存，且變異小干 擾固索少，線性范圍良好，并與酶法有高度相關。實踐證
明該法不失為經濟、實用值得推廣的尿素測定技術。
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尿素是最早被測定的體液中的物質之一t其測定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶聯速率法等t這些方法或是存在煮沸，或是試劑價格較昂貴 目前，市場上
供應了鄰苯二甲醛顯色法(OPA)測定尿素試劑盒，該 法不需煮沸，簡便、快速、準確、穩定易得。我們根據反應 原理，在 ISP-M 半自動生化分析儀上進行尿素測定， 效果滿意。特做報道
1 原理
在酸性環境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下與 鄰苯二甲醛作用生成黃色物質，該物質在偏釩酸根的作 用下變為藍色物質。該物質藩液顏色的深淺在一定范圍
內與血清尿素濃度成正比，與同樣處理的標準物一起比 色測定，即可得到血清標本中尿素的濃度。
2 材料與方法
2．I 試劑 OPA法測定尿索試劑盒}其中包括A液 B 液，尿素標準液，僳定長城臨床試劑公司t批號 951102。 酶偶聯速率法測定尿素試劑盒：上海長征醫學科學有限
公司，批號 950828
2．2 儀器
IsP—M 半自動生化分析僅，型號V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在臨用前 10：1混臺．25ul樣 本中加入1．1ml混臺液，37"(315分鐘．在IsP—M半自 動 生化分析儀上 測定 終點法，比空白調霉，波長 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同時以咎氨酰脫氫 醇偶聯反應法，也在半自動生化分析僅上進行動力學分 析。
3 結果與討論
作者單位，五河縣壓院檢驗科(233309) 試劑。但進口試劑價格較貴，使用國產試劑或自配試劑 必須達到與進口試劑相同的檢驗效果，井用標本質控液 進行標定，方可使用 叢玉隆在血液分析儀應用中的幾個問題Ⅲ一文中 指出：細胞直方圖既給臨床提供診斷參考數據，也為操 作人員提供對儀器工作狀態和實驗結果是否可信的監 控，一般必須在仔細分析直方圖后，確定是否需要顯微 鏡檢查再發報告。我們應該不斷的總結經驗 ，發現問題， 不斷提高專業人員的技術水平，使其更好的為臨床醫療 工作服務
3．1 線性范圍 在 0～71．4mraol／I范圍內配制 Lo種 不同濃度的尿素溶液 ，每種濃度溶液重復測定 3捷 該 法在尿素維度o～28mraol／I之閫線性良好。
3．2 精密度實驗 選用高、中、低值尿素(濃度為 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，測定 2O次，其批內CV分別為 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分別為 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事實驗
在尿素濃度為 7．87和 21．50mmol／ l的血清標本中，加入尿素濃度為 6．Ommol／1．，然后進行 測定，其回收率分別為 90 和 98
3．4 干擾實驗 配制 513mmol／1膽紅索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血紅蛋白做干擾實 驗．發現無明顯干擾 (P>005)t維生索 C濃度低于
75mg／1時無干擾(P>0．05)實驗室使用的重氨試劑對 苯磺酸可干擾反應．測定時應防止此類物質在實驗室中 污染 。
3．5 準確性實驗 用 OPA顯色法和各氧酰脫氫酶偶聯速率法同時測定血清標本 50倒(本院門診健康體檢 者)，分別得 土S為 5．18士1．70、5．28±1．73。統計學
處理，兩法無顯著性差異(P>0．05)，相關系數 r為 o． 9804．回歸方程 Y一1．0ix+0．0456。
總之，鄰苯二甲醛法測定尿索既有酶法的方便．可 自動化分析，又價廉，試劑穩定可室溫保存，且變異小干 擾固索少，線性范圍良好，并與酶法有高度相關。實踐證
明該法不失為經濟、實用值得推廣的尿素測定技術。
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