低溫條件下鄰苯二甲醛對分枝桿菌殺滅效果的研究
發布時間：
2022-12-13
鄰苯二 甲醛復配可制成鄰 苯二 甲醛 消毒液 ，用 于醫療器械的高水平消毒。其較低濃度時殺菌效果 較好且 受 酸 堿度 影 響 較小 ，可直 接 使 用 ，無 需 活 化… ，并且揮 發性 小 ，使用 環境 中殘 留濃度 較低 。 近年來 ，隨著相關標 準規范 ’推 出，其應用逐漸擴 大 。國家相關標準 規定 ，其作用時間>15min。由 于大部分消毒劑的殺菌消毒效果都會受到溫度的影 響 ，相關研究在 (20±1)cC條件下進行 。為觀察 鄰苯二 甲醛消毒液在 ≤20℃時的殺菌效果 ，分別選 擇進 口和國產 2種鄰苯二 甲醛消毒液市售產 品，以抗力較強的龜分枝桿菌為試驗菌進行 了相關實驗 ， 結果報告如下 。
1 材 料 與方 法 1．1 材料 消毒 液 A 為 國 產 某 產 品 ，標 識 有 效 含 量 為 5．0g／L～6．0g／L。經高效液相色譜法 測試 ，鄰苯 二甲醛含量 5．6 L，pH值為 7．7O。消毒液 B為進 口某產品 ，標識 有效含量為 5．0g／L一6．0g／L。經 相同方 法測 試 ，含鄰 苯 二 甲醛 5．7 L，pH 值 為 7．70。試 驗 菌 中為 龜 分 枝 桿 菌 膿 腫 亞 種 (ATCC 19977)，由中國菌種保藏 中心提供 凍干管 ，于實驗 室內 自制第 5、6代斜 面培養物備 用。中和劑為含0．3％卵磷脂 、3％ 吐溫和 1％甘氨酸 的磷酸鹽緩 沖 溶液 ，按《消毒技術規范》 要求鑒定合格。分枝桿 菌培養基為 MiddleBrook7H11瓊脂 ，由國內某公司 生產 。配制時加入 0．5％甘油 ，滅菌后備用 。在溫 度為 50℃ ～55℃時加入 10％無菌小牛血清 ，混勻 后使 用。THD 一0515低 溫 恒 溫 槽 ，溫 度 范 圍 為 一 5℃ ～100oC，溫度波動度 (±0．05)℃。 1．2 方 法 1．2．1 菌懸液和菌片的制備 取培養 72h的新鮮 斜面 ，用 5ml滅菌 吸量管吸取 TSB營養 肉湯 ，將菌 苔從斜面通過吹吸 的方式洗下 ，隨后吸出液體置 于 另一含有 6g～7g玻璃珠 的無菌離心試管 中 ，用 電動混合器進行混合至少 5min，再充分敲打振搖 ， 使細菌分散均勻 ，然后將菌液吸人到另一無 菌試管 內并用 TSB稀釋至含菌量約為 1×10cfu／ml～5× 10cfu／ml的試驗用菌懸液。取 20ul菌懸液 ，染 于 圓形不銹鋼載體上(直徑 10mm，厚度為 0．5mm)， 用取菌環將菌液在載體上涂勻后置于 37℃培養箱 中烘干后備用。 1．2．2 載體定量殺菌試驗 按每個載體菌片 5ml 的用量 ，將鄰苯二甲醛消毒液置于平皿 中，分別置于 5．0℃ 、10．0℃ 、15．0oC和 20．0 水浴恒溫。將制 備好的菌 片浸于消 毒液 中，每個 溫度均 分別 作 用 5．0min、10．0min、15．0min和 20．0min，達到要求 時間后 ，將菌片平移入 5m1中和劑 中，電動混合 器 振蕩至少 5rain，中和時間 10min。振搖敲打試 管 ， 將載體上 的菌充分洗脫 ，取 洗脫液或稀釋液進行接 種計數 ，計算殺滅對數值 。試驗進行 3次 。 2 結果 兩種 鄰苯 二 甲醛消 毒劑 在 5．0℃、10．0℃ 、 15．0 和 20．0℃作用溫度下 ，對分枝桿菌殺滅對 數值 >3．0的最短作用分別為 20．0min、15．0min、 10．0min和 5．0min3 討 論 鄰苯二 甲醛消毒劑應用歷史較短，其材料相容 性 良好 ，對一般醫療器械如 內鏡等醫院常用器材均 無腐蝕性 ，不 良氣味較小 ，有效使用濃度低。國內已 有很多相關性能研究 的文獻報道 。。，均表明其對 細菌 、真菌和病 毒等有較好 的殺滅作用。同時也發 現影響鄰苯二 甲醛殺 菌效果 的因素較多 ，其 中 pH 值影響較大 ，較 高的 pH值會 增強其殺菌效 果 。 本研究所用 2種產品均呈弱堿性。戊二醛消毒液 中 經多年使用 ，對其具有抗性 的分枝桿菌菌株已被分 離出¨引，而鄰苯二 甲醛對分枝桿菌具有快速殺滅作 用 ，在中水平消毒時與戊二醛消毒液相 比具有一定 的優勢¨ 引。尤其在軟式 內鏡的消毒方面 ，近年來 鄰苯二 甲醛在大型醫療機構 中的應用 已較為廣泛。 根據 2002年版《消毒技術規范》的要求 ，國內 消毒產 品的鑒定 均在 20℃條件下進行 ，有報道表 明，鄰苯二 甲醛對芽孢 的殺滅效果會受到溫度的影 響，提高作用溫度會使殺菌能力增強 ，降低溫度會減 弱其殺菌效果¨ 。本研究所 用消毒液均應 為原 液 使用 ，如果用懸液法 ，由于方法設計 的原 因，加入 的 菌液會使消毒液被稀釋 ，其作用體系 中消毒液被稀 釋 了 1．25倍 。不銹鋼片載體更接近于內鏡及其他 醫療器械的材質 ，有研究報道對鄰苯二 甲醛殺菌效 果檢測采用不銹鋼片作為載體 j，本研究 同樣以不 銹鋼片為載體 ，采用載體定量 殺菌試驗進行 了相關 檢測。鑒于我國大部分地區冬 、夏季溫差大 ，若冬季 消毒時室 內取暖設備不完備 ，消毒劑作用溫度可能 <20oC。本研究在 <20℃條件下 檢測兩種鄰 苯二 甲醛消毒劑殺菌效果 ，結果提示 ，要確保消毒效果需 適當延長作用時 間。實際應用 中，鄰苯二 甲醛消毒 液一般會被連續使用 ，且最低有效濃度 為 0．3％ ，本 研究僅對一般市售消毒液原液進行低溫殺菌效果檢 測 ，對在使用過程 中其濃度降低后不 同低溫下 的作 用時間 ，還有待于進一步研究。 參 考 文 獻 [1] 常文 軍，蔡 全才 ，徐荷 ，等．鄰苯二 甲醛 消毒劑研究 進展 [J]． 中國消毒學雜 志 ，2004，21(1)：67—69． [2] 中華 人民共 和國衛 生部．醫療 機構消毒技術 規范[S]．2012． [3] 中華人 民共 和國國家衛生 和計劃 生育委員會 ．軟式 內鏡 清洗 消毒 技術規 范 ：WS507—2016[s]．2016． [4] 張文福．醫學消毒學[M]．北京 ：軍 事醫學科學 出版社 ，2002： 102—125． [5] 陳金龍 ，帖金風 ，王長德．兩種儀器分析方法測定復方鄰苯二甲 醛含量的比較研究[J]．中國消毒學雜志 ，2014，31(4)：396—397．
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